外泌体

Britta AnderssonWillman, Ulf Gehrmann, Zekiye Cansu, Tina BuerkiThurnherr, Harald Krug, Susanne Gabrielsson, Annika Scheynius (2012) 亚毒性浓度的二氧化钛及氧化锌纳米粒子对人类细胞，树突状细胞和外泌体产生的效应，Toxicology and Applied Pharmacology, http://dx.doi.org/10.1016/j.taap.2012.07.021在油漆和涂料工业以及在化妆品中广泛使用了金属氧化物纳米粒子，但其可能与免疫系统的相互作用的知识非常有限。我们的目的是查究市面上的出售的二氧化钛和氧化锌纳米粒子会否影响人体免疫细胞，及其产生的外泌体，纳米大小的囊泡在细胞间通讯的作用。我们发现，在从1到100微克/毫升的浓度，二氧化钛或氧化锌纳米颗粒没有影响初级人体外周血单核细胞peripheral blood mononuclear cells （PBMC）的存活性。相比之下，树突状细胞monocytederived dendritic cells （MDDC）的细胞死亡和蛋白酶的活性取决于氧化锌的剂量，但对二氧化钛纳米粒子没有相同反应。曝露于无毒性，10微克/毫升的二氧化钛和氧化锌纳米粒子并没有显著改变MDDC的表型。有趣的是，氧化锌但不是二氧化钛纳米粒子诱发FcγRIII（CD16）的下调表现于在PBMC群的NK细胞，这表明，亚致死浓度的氧化锌纳米粒子可能有对FcγR介导的免疫反应有影响。暴露于纳米颗粒的PBMC或MDDC所产生的外泌体的类型和大小跟在控制环境下培养的外泌体相似。混在外泌体中或与外泌体联合的二氧化钛或氧化锌纳米粒子可能不会被透射电子显微镜检测到。我们的结论是二氧化钛和氧化锌纳米粒子对人体免疫细胞有不同的影响，在研究纳米粒子对免疫功能的潜在影响时，应以??亚毒浓度在不同的主体免疫细胞上进行。.. 外泌体在PBS稀释后以纳米粒子跟踪分析（NTA）软件进行分析...

由PBMC或MDDC分离出来，曝露于无毒性浓度的二氧化钛或氧化锌纳米颗粒或培养在培养基中（对照组）的外泌体特征。
以DC蛋白测定的分离后的外泌体蛋白质浓度（A）。
以Nanosight测量的从PBMC（B）或MDDC（C）分离培养基培养的外泌体代表性粒度分布。
以Nanosight测量的分离后的外泌体的囊泡大小（D，E）和囊泡浓度(以每1×106个细胞表达)（F，G）。
A，D-G中的结果表示为平均±标准误，6至8名健康捐血者。
统计意义与非参数Wilcoxon检验测试比较，与 外来产生的未刺激细胞对照。