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RNA
2013-4-16  浏览量:7901

RNA

Christina Troiber, Julia C. Kasper, Silvia Milani, Max Scheible, Irene Martin, Frank Schaubhut, Sarah Küchler, Joachim Rädler, Friedrich C. Simmel, Wolfgang Friess and Ernst Wagner (2012) 比较四种不同用于siRNA复合物鉴定的粒子大小测量方法,European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics,可供网上下载 2012年10月15日。
http://dx.doi.org/10.1016/j.ejpb.2012.08.014

摘要
能够可靠地确定siRNA复合物大小是合理设计粒子和其配方,以及其在体内的安全应用的关键。目前没有标准的大小测量技术。每种方法都有其不同的原理,因此,可能会得到不同的结果。在这研究中评定了四种同质和异质的siRNA复合物的适用性的分析方法:动态光散射(DLS),原子力显微镜(AFM),纳米粒子追踪分析(NTA)和荧光相关光谱(FCS)。

本研究中使用了三种不同的siRNA各式复合组合物,产生自不同的,精确的和疏水性的修改了的oligoaminoamides。所有的被评定的方法是适合于中型,同质的siRNA复合物(?120 nm)分析。小的颗粒(<40nm)不能被NTA方法追踪,但可被其它三种方法测量。异质复合物一般很难分析。只有原子力显微镜的可对异质复合物进行观察。 FCS是唯一的方法,适合用于测量在90%牛胎儿血清中的复合物稳定性。复合物的物理化学特性在体内应用和未来的配方开发成功的重要质量标准。因此,由一个以上的方法组合而成的全面分析是由其重要的。


Fig:NTA of 332 polyplexes in HEPES pH 7.4: A) 3D polt of relative intensity versus particle size; B) Microscope pictures of tracked particles.